Un método eficiente para la extracción de ARN total de alta calidad de varios tejidos de Myrciaria dubia (camu camu)

Ánderson E. Medina, Marianela Cobos, Jorge L. Marapara, Sixto A. Imán, Juan C. Castro

Resumen


Myrciaria dubia (Kunth) McVaugh (camu camu) es un frutal nativo de la Amazonía que sobresale por el alto contenido de ácido L-ascórbico (vitamina C) en sus frutos. Pero, los estudios sobre expresión de genes en esta especie son escasos, debido a la falta de métodos de extracción de ARN total. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue desarrollar un método eficiente para la extracción de ARN total de alta calidad de varios tejidos de M. dubia. Las muestras botánicas (brotes florales, inflorescencias, frutos verdes, pintones y maduros) fueron obtenidas de la Colección Nacional de Germoplasma de M. dubia del Instituto Nacional de Innovación Agraria. El ARN de los diferentes tejidos fue extraído con un método que combina la destrucción mecánica de la pared celulósica, la lisis celular con el detergente bromuro de hexadeciltrimetilamonio, la extracción y precipitación de los ácidos nucléicos con solventes orgánicos y sales. Los análisis espectrofotométricos (A260/A230= 2,62 ± 0,09; A260/A280= 1,82 ± 0,03) y electroforético (bandas de ARNr 28S y 18S sin evidencias de degradación) indican que el ARN total extraído es de alta calidad. Asimismo, el método desarrollado mostró altos rendimientos (515,60 ± 190,35 μg de ARN/g tejido). En conclusión, se ha desarrollado un método eficiente que nos permite la extracción de ARN total de alta calidad y cantidad apropiadas para realizar estudios de expresión genética en varios tejidos de M. dubia.


Palabras clave


ácidos nucléicos; expresión genética; frutal amazónico; purificación

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