Comparación de dos métodos para aislar ADN genómico humano a partir de discos de papel filtro impregnados con sangre total

Frida E. Sosa-Amay, Hicler N. Rodríguez, Juan C. Castro

Resumen


El aislamiento de ADN genómico humano (ADN ) es requerido para una gran variedad de análisis genético- gh moleculares. Varios laboratorios con suficientes recursos aíslan el ADN con kits comerciales, estos gh presentan ventajas, pero son caros y no siempre funcionan para diversos tipos de muestras biológicas. Por tanto, es necesario disponer de métodos alternativos con características similares, pero baratos y de “amplio espectro”, es decir, que funcionen para diversos tipos de muestras biológicas. Por lo que, el objetivo de esta investigación fue comparar dos métodos para aislar ADN a partir de discos de papel filtro gh impregnados con sangre total. Con un estilete se recolectaron muestras de sangre capilar de 10 individuos adultos y se procedió a impregnar la muestra en discos de papel filtro. Posteriormente, se aisló el ADN con gh el QIAamp DNA Mini Kit y un método casero que usa el detergente bromuro de hexadeciltrimetilamonio (BHTMA) y solventes orgánicos. El ADN obtenido con ambos métodos fue analizado por gh espectrofotometría y electroforesis para determinar su calidad y cantidad. También, la calidad se evaluó mediante amplificación con la reacción en cadena de la polimerasa (RCP). Los resultados del análisis espectrofotométrico muestran que con el método casero se obtuvo ADN de mayor calidad (A /A = 1,7 ± gh 260 280 0,3; A /A = 1,9 ± 0,4) que con el kit comercial (A /A = 1,5 ± 0,5; A /A = 1,6 ± 0,2). Asimismo, con el 260 230 260 280 260 230 método casero se obtuvo ̴1,4 veces más ADN que con el kit comercial. Finalmente, mediante los análisis gh electroforéticos y amplificación por la RCP se corroboró la alta calidad del ADN obtenido con ambos gh métodos. En conclusión, con un método casero basado en el uso del BHTMA se logró aislar ADN de alta gh calidad y cantidad apropiada para análisis moleculares que demostró ser superior en varios parámetros en comparación con un kit comercial.

Palabras clave


Ácidos nucleicos; Análisis genético-moleculares; BHTMA; Purificación de ADN

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